El Reglamento para la Calidad del Agua Potable N° 38924-S y su reforma decreto N° 42332-S, establecen los límites máximos permisibles para la calidad del agua para consumo humano, que deben utilizar en todas las empresas que desarrollen procesos productivos, incluyendo actividades alimentarias, crenoterápicas, recreativas y agropecuarias.

En el artículo 8, establece los niveles de control de calidad del agua y parámetros de análisis obligatorio. El Nivel Primero (N1) corresponde al programa de control básico, el cual consiste en la inspección sanitaria para evaluar la operación y mantenimiento en la fuente, el almacenamiento, la distribución del agua potable y la determinación de los siguientes parámetros: color aparente, conductividad, pH, olor, sabor, temperatura, turbiedad, coliformes fecales, Escherichia coli, y cloro residual libre o combinado, como se indica en el siguiente cuadro del reglamento:

Lo cual puede generar confusión, ya que se puede interpretar que se deben analizar los dos indicadores coliformes fecales como para Escherichia coli.

La presencia de Escherichia coli indica contaminación fecal en agua, ya que este microorganismo es habitante normal del tracto digestivo de animales de sangre caliente y rara vez se encuentra en agua o suelo que no haya sufrido algún tipo de contaminación fecal, por ello se considera como indicador universal.

Los coliformes fecales presentes en una muestra deben confirmarse con presencia de Escherichia coli, por lo tanto lo ideal es contar con una prueba que detecte Escherichia coli de manera rápida y eficaz.

La tecnología de sustrato definido (TSD) detecta de forma simultánea los coliformes totales y Escherichia coli, mediante dos nutrientes indicadores, ONPG y MUG, principales fuentes de carbono y que son metabolizados por la enzima coliforme β-galactosidasa y la enzima β-glucuronidasa de Escherichia coli. A medida que van multiplicándose los coliformes usa β-galactosidasa para metabolizar ONPG y cambiarla de incolora a color amarillo. Para Escherichia coli usa la β-glucuronidasa para metabolizar MUG y crear fluorescencia.

Puesto que la mayoría de organismos no coliformes carece de estas enzimas, son incapaces de multiplicarse e interferir en este proceso. Los escasos no coliformes que contienen estas enzimas se eliminan de manera selectiva gracias a la formulación de la tecnología de sustrato definido (TSD). Por ejemplo, la prueba IDEXX Colilert, el ONPG se vuelve amarillo cuando es metabolizado por coliformes y el MUG se vuelve fluorescente bajo luz UV cuando es metabolizado por Escherichia coli.

La prueba Colilert detecta de forma directa Escherichia coli, cumpliendo con lo indicado en el oficio DPAH-UASSAH-1874-2019 del decreto 38924-S.

La tecnología de sustrato definido (TSD) es la base para las pruebas de coliformes totales, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Legionella pneumophila y Enterococos de IDEXX Laboratories.